%0 Thesis
%9 Other
%A 0617011032, Feraliana
%B MIPA
%D 2015
%F eprints:15991
%I Universitas Lampung
%T AMOBILISASI ENZIM -AMILASE DARI Bacillus  subtilis ITBCCB148 DENGAN MENGGUNAKAN CM-Sephadex C-50
%U http://digilib.unila.ac.id/15991/
%X - -1,4 glikosida  pada amilum.  Enzim ini banyak dimanfaatkan dalam proses-proses industri baik  yang berhubungan dengan pangan maupun non-pangan. Dalam proses industri,  enzim ini harus mampu bekerja pada pH ekstrim dan mempunyai stabilitas termal  yang tinggi. Namun, umumnya enzim tidak stabil pada kondisi tersebut.  -amilase dari  Bacillus subtilis ITBCCB148 dengan cara amobilisasi menggunakan CMSephadex  C-50.    Untuk  mencapai  tujuan  tersebut,  dilakukan  produksi,  isolasi,  dan  pemurnian    enzim meliputi : fraksinasi dengan amonium sulfat, dialisis, dan  kromatografi kolom penukar kation CM-selulosa.  Enzim hasil pemurnian  kemudian diamobilisasi dengan menggunakan CM-Sephadex C-50. Penentuan  aktivitas -amilase dilakukan dengan metode Fuwa dan metode Mandels,  sedangkan penentuan kadar protein dilakukan dengan metode Lowry.  Hasil penelitian menunjukkan enzim hasil pemurnian memiliki aktivitas  spesifik sebesar 21.400 U/mg, meningkat kemurniannya 15 kali dibandingkan  ekstrak kasar enzim dengan perolehan 11%.  Enzim ini memiliki suhu optimum  60  °  C, harga K  M  menit  -1  = 6,32 mg mL  -1  substrat dan harga V  maks  .  Uji stabilitas termal pada suhu 60  °  = 138,89 mol mL  C selama 60 menit masih memiliki  aktivitas sisa 23%, t  1/2  = 33,64 menit, k  i  = 0,0206 menit  -1  i  = 103,97 kJ mol  .  Amobilisasi enzim hasil pemurnian dengan menggunakan CM-Sephadex C-50  menghasilkan enzim hasil amobilisasi dengan suhu optimum yaitu 70  C dengan  nilai K  M  yaitu 6,90 mg mL  -1  dan V  maks  yaitu 90,09 mol mL  .  Uji  stabilitas termal enzim sesudah amobilisasi pada suhu 60  C selama 60 menit  masih memiliki aktivitas sisa sebesar 51%, k  i  i  = 105,12 kJ mol  -1  = 0,0136 menit  °  -1  -1  , t  1/2  .  Hasil amobilisasi menunjukkan peningkatan stabilitas termal enzim hingga  1,51 kali dibandingkan enzim hasil pemurnian sebelum amobilisasi.  Data yang  diperoleh menunjukkan penurunan nilai K  M  dan kenaikan nilai V  maks  , penurunan  nilai k  i  , peningka  i  yang menunjukkan bahwa amobilisasi  meningkatkan rigiditas enzim sehingga lebih stabil terhadap pH dan suhu.  °  menit  -1  = 50,96 menit,  -1  -1